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第一章 植物细胞工程的理论基础——细胞全能性学说1

第一节 胚性细胞——植物的干细胞2

一、合子和早期胚胎细胞3

二、顶端分生组织中的干细胞（胚性细胞）及其基因调控3

三、植物成熟物器官中遗留的胚性细胞5

第二节 从分化细胞到胚性细胞6

一、细胞脱分化过程的形态学和生物化学变化7

二、分化细胞脱分化过程中细胞结构的变化9

三、分生细胞的再分化与植株再生11

参考文献14

一、培养基制备实验室15

第二章 细胞培养的设备和基本方法15

第一节 实验室及设备15

二、无菌操作室16

三、培养室16

四、显微工作室17

第二节 器皿的选择与清洗18

一、配制培养基需要的器皿18

二、细胞组织培养用的器皿18

三、玻璃器皿的清洗19

第三节 培养基的配制20

一、母液的配制21

二、培养基的配制程序22

第四节 材料器械的消毒与无菌操作23

一、植物材料的消毒23

二、器械的消毒24

三、超净工作台与无菌操作的步骤24

第五节 细胞计量技术25

一、细胞计数25

二、细胞体积的测量25

三、细胞的鲜重和干重26

四、有丝分裂指数26

五、植板率26

第六节 植物激素调控离体细胞的器官与胚胎发生26

一、植物激素的种类和性能27

二、细胞分裂素和生长素对细胞增殖和器官发生的调控作用28

参考文献30

第三章 植物组织培养脱毒快速繁殖技术31

第一节 植物快速繁殖的途径与方法技术34

一、利用芽和茎尖培养进行快速繁殖34

二、利用植株再生技术进行快速繁殖38

三、试管苗开花技术41

四、操作实例之一：红豆杉的茎尖培养与快速繁殖41

五、操作实例之二：蝴蝶兰的组织培养与快速繁殖42

第二节 组织培养脱病毒快速繁殖技术44

一、茎尖培养脱毒技术44

二、高温和低温处理脱毒技术45

四、其他脱毒技术46

三、化学处理脱毒技术46

五、操作实例：马铃薯茎尖培养脱毒的操作步骤47

第三节 植物病毒的鉴定49

一、指示植物法49

二、抗血清鉴定法49

三、酶联免疫法49

四、电子显微镜检查法50

五、RT-PCR方法51

参考文献51

第四章 胚胎培养和胚乳培养52

一、成熟胚培养53

第一节 胚胎培养53

二、幼胚培养55

三、胚胎培养的应用62

第二节 胚乳培养和三倍体的产生66

一、胚乳愈伤组织的诱导67

二、胚乳愈伤组织的分化和植株再生68

三、胚乳愈伤组织和再生植株的染色体数目69

四、胚乳培养的操作实例70

五、胚乳培养的应用前景71

参考文献71

二、未传粉子房培养与离体受精74

一、传粉后子房的培养74

第一节 子房、胚珠培养和离体受精74

第五章 子房、胚珠和合子培养与离体受精74

三、胚珠培养与试管受精75

四、试管受精在育种上的应用75

第二节 离体受精与合子培养76

一、精子的分离76

二、卵细胞的分离78

三、精卵离体融合79

四、合子离体培养80

参考文献81

一、体细胞胚胎发生的普遍性84

第一节 体细胞胚胎发生84

第六章 体细胞胚胎发生和人工种子84

二、胚状体的发生过程85

三、影响胚状体发生和发育的因素87

第二节 人工种子90

一、控制胚状体的同步发育90

二、胚状体的包埋与人工种子的制作91

参考文献91

第七章 体细胞无性系变异与植物改良94

第一节 体细胞无性系变异的普遍性94

一、体细胞再生植株的变异94

二、花粉植株的无性系变异97

三、影响无性系变异频率的因素98

一、染色体数目和结构变异99

第二节 体细胞无性系变异的遗传学特点99

二、分子水平的变异103

第三节 无性系变异在育种上的应用105

一、在田间从再生植株中选择有用的细胞突变体105

二、利用选择压选择有用细胞突变体105

三、利用体细胞无性系变异获得易位系107

参考文献109

第一节 单倍体植物在遗传育种上的价值113

一、利用单倍体植物控制杂种分离，加快常规育种速度113

第八章 单倍体的诱导与单倍体育种113

二、提高常规育种的选择效率114

三、利用H系进行基因定位和绘制遗传图115

第二节 通过远缘杂交诱导单倍体115

一、远缘花粉授粉诱导孤雌生殖115

二、染色体消除法116

三、半配合法Vsg120

第三节 花药培养产生单倍体120

一、花药培养的一般程序122

二、影响花药培养成功率的因素122

三、雄核发育的细胞学127

四、花药培养的操作实例129

第四节 游离小孢子培养产生单倍体131

一、小孢子的分离方法132

二、影响小孢子培养成功率的因素133

三、小孢子培养操作实例135

第五节 未传粉子房和胚珠培养产生单倍体136

一、子房培养诱导单倍体植株成功的经济植物137

二、影响离体子房产生单倍体的因素139

三、离体子房中单倍体植株发生的胚胎学139

四、未传粉子房培养的操作实例140

第六节 单倍体育种的进展与前景141

参考文献146

第九章 原生质体培养和体细胞杂交150

第一节 原生质体的分离152

一、材料的来源及预处理152

二、用于制备原生质体的酶类152

三、酶溶液的配制153

四、原生质体的制备与活力检测153

五、原生质体制备的一般程序154

第二节 原生质体的培养方法155

一、供体材料155

二、培养基155

三、培养方式157

第三节 原生质体培养操作实例158

一、烟草158

四、原生质体培养的一般程序158

二、锦橙159

三、水稻160

第四节 原生质体融合与体细胞杂交161

一、原生质体融合161

二、选择杂种细胞的方法163

三、体细胞杂种的鉴定164

四、胞质杂种165

第五节 体细胞杂交技术在农业上的应用166

一、体细胞杂交合成新物种166

二、体细胞杂交培育抗病新种质166

参考文献167

三、胞质杂种在育种上的利用167

第十章 药用植物细胞的大量培养170

第一节 愈伤组织的诱导和悬浮细胞系的建立173

一、愈伤组织诱导和培养条件的优化173

二、悬浮细胞系的建立175

第二节 高产细胞系的筛选与保存176

一、高产细胞系的筛选176

二、高产细胞系的超低温保存177

第三节 利用生物反应器进行细胞大量培养177

一、用于植物细胞大量培养的生物反应器178

二、操作实例：生物反应器培养水母雪莲细胞产生黄酮类化合物179

参考文献182

第一节 农杆菌转化法185

一、自然界农杆菌的基因转化185

第十一章 植物细胞转化技术185

二、野生型Ti质粒的结构与功能186

三、Ti质粒的改造187

四、农杆菌转化的操作实例188

第二节 基因枪转化法191

一、基因枪的类型和结构192

二、操作实例：小麦的基因枪转化193

第三节 花粉管通道转化法196

参考文献197

第一节 无融合生殖的类型199

第十二章 无融合生殖与杂种优势的永续利用199

一、减数胚囊中的无融合生殖200

二、未减数胚囊中的无融合生殖201

三、孢子体无融合生殖（不定胚生殖）202

第二节 无融合生殖的遗传学202

一、无融合生殖的基因调控202

二、无融合生殖的遗传操作203

三、无融合生殖分子生物学研究和基因工程203

参考文献204

附录 常用培养基（按字母顺序排列）206

缩略语211

中西文名词对照212